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      Tricine-SDS-PAGE凝膠制備試劑盒說明書
      點(diǎn)擊次數(shù):1985 更新時(shí)間:2020-08-24

       

      Tricine-SDS-PAGE凝膠制備試劑盒說明書

       

      Tricine-SDS-PAGE Gel Kit

      Tricine-SDS-PAGE凝膠制備試劑盒

       

      目錄號:K2384

       

       

      組分說明及保存條件

       

                 Cat. No.          K2384

                                                  保存條件

                 Size             約 50塊膠

               49.5%T 3%C         30 ml               2-8ºC

               49.5%T 6%C         100 ml               2-8ºC

               凝膠緩沖液           140 ml               2-8ºC

               甘油                30 ml               室溫

               APS                0.5 g                室溫

               TEMED               750 ul           室溫,避光

       

      本產(chǎn)品所提供的 APS(過硫酸銨)為固體粉末,使用前加入雙蒸水溶解即配制成10%APS溶液(0.5 g  APS加5 ml雙蒸水),將溶液分裝后置于-20℃保存,通常半年內(nèi)有效。溶液在使用中可放置4℃保存兩周。

       

      本產(chǎn)品僅供科研使用,請勿用于臨床診斷及其他用途  

       

       

      產(chǎn)品簡介

       

        常規(guī)的Tris-SDS-PAGE電泳的只能分辨大分子蛋白,對于相對分子量小的,尤其

      是10 kD以下的蛋白分辨率極低。而Tricine-SDS-PAGE可以很好的分離分子量在1-10 kD

      的蛋白及多肽,成為目前電泳法變性分離多肽的主要方法。本產(chǎn)品包括Tricine-SDS-

      PAGE凝膠制備所需全套試劑,只需自備蒸餾水,即可制備高質(zhì)量各種濃度的凝膠,方

      便、快捷,電泳后可直接用于考染、銀染、Western雜交等實(shí)驗(yàn)。

       

      注意事項(xiàng)

       

      1.  10%APS配制后分裝-20度保存。APS溶液不穩(wěn)定,應(yīng)盡量減少室溫存放時(shí)間,每

      次取用后立即放回冰箱,以防失效;若發(fā)現(xiàn)凝膠聚合時(shí)間延長,應(yīng)考慮更換,使用

      -20度保存的10%APS。

      2.在凝膠配制過程中,尤其是液體混勻步驟,應(yīng)盡量避免氣泡的產(chǎn)生。

      3.在分離膠上層加蒸餾水時(shí)要小心操作,加水時(shí)速度不能太快。

      4.丙烯酰胺具有神經(jīng)毒性,操作時(shí)請穿著實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套。

      5.本產(chǎn)品僅用于科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)或人體治療。

       

      操作步驟

       

      根據(jù)目的蛋白分子量大小選擇合適的PAGE分離膠配制濃度,凝膠濃度配方參考附表。

       I 配制分離膠

      1.將不同體積的雙蒸水、49.5%T 6%C、凝膠緩沖液和甘油加入到離心管中混合。

      2.加入10%APS和TEMED,立即渦旋混勻5-10秒,以使溶液充分混勻。

      3.在凝膠模具中迅速灌入適量分離膠溶液(1 mm mini-gel,分離膠溶液加約4 ml),

         然后在分離膠溶液上輕輕覆蓋一層1-3  cm的水層,使凝膠表面保持平整。

      4.靜置,待分離膠和水層之間出現(xiàn)一個(gè)清晰的界面表示凝膠已聚合。

       

       II 配制夾層膠

        去除覆蓋在分離膠上的水層,用濾紙將殘留的水盡量吸去。

      1.將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。

      2.加入10%過硫酸銨和TEMED,立即渦旋混勻5-10秒,以使溶液充分混勻。

      3.將適量的夾層膠溶液迅速加至分離膠的上面(對于1 mm的mini-gel,夾層膠溶液加

         約1 ml ),然后在夾層膠溶液上輕輕覆蓋一層水層,使凝膠表面保持平整。

      4.靜置,待夾層膠和水層之間出現(xiàn)一個(gè)清晰的界面表示凝膠已聚合。

       

      III 配制濃縮膠

      去除覆蓋在夾層膠上的水層,用濾紙將殘留的水吸去。

          1.將不同體積的雙蒸水、49.5%T 3%C和凝膠緩沖液加入到離心管中混合。

          2.加入10%過硫酸銨和TEMED,立即渦旋混勻5-10秒,以使溶液充分混勻。

          3.將梳子插入凝膠內(nèi),避免產(chǎn)生氣泡。

          4.待凝膠聚合后,小心地拔出梳子,以免破壞加樣孔。

          5.進(jìn)行電泳操作。

       

      IV 電泳

      將電泳槽放入4℃或冰水浴中,外槽加入陽極緩沖液(K2388),內(nèi)槽加入陰極緩沖液(K2387),30V預(yù)電泳10 min,將樣品(已經(jīng)過Tricine上樣緩沖液YJ2385處理)加入點(diǎn)樣孔后30V電泳1小時(shí),100V電泳至溴酚藍(lán)到達(dá)膠底部后停止電泳,進(jìn)行后續(xù)的考馬斯亮藍(lán)染色或電轉(zhuǎn)。

       

       

      實(shí)驗(yàn)代做服務(wù):

       

      免疫組化IHC染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      細(xì)胞、組織TUNEL凋亡染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      試劑盒免費(fèi)代檢測

      實(shí)驗(yàn)室代做實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目

       

      透射電鏡服務(wù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

      核仁組成區(qū)嗜銀-AGNOR染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      免疫共沉淀(CHIRP)實(shí)驗(yàn)

      RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀(RIP)實(shí)驗(yàn)代做

      酶聯(lián)免疫(ELISA)技術(shù)服務(wù)

      雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

      喹諾酮類快速檢測試劑盒

      組織芯片/微陣列定制技術(shù)服務(wù)

       

      染色質(zhì)免疫沉淀分析(CLIP)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

       

      多因子液相芯片技術(shù)(Luminex)實(shí)驗(yàn)

      免疫細(xì)胞化學(xué)ICC實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      ATP/ADP檢測實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      蛋白雙向(2-D)電泳實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      蛋白相互作用分析

      堿性磷酸酶染色實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      PKC活性檢測實(shí)驗(yàn)

      非標(biāo)定量實(shí)驗(yàn)

      (Label-free)

       

      DIGE技術(shù)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      端粒酶活性檢測實(shí)驗(yàn)

      細(xì)胞生長曲線的測定

      掃描電鏡服務(wù)

      NF-KB p65活性檢測實(shí)驗(yàn)

       

      慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)服務(wù)

      滬公網(wǎng)安備 31011802001676號

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