• <ul id="ssauq"><acronym id="ssauq"></acronym></ul>
  • <strike id="ssauq"><menu id="ssauq"></menu></strike>
  • <noscript id="ssauq"><table id="ssauq"></table></noscript>
    • 當前位置:
      首頁 > 技術文章 > 介紹免疫沉淀CHIP的三個實驗步驟
      目錄導航 Directory
      服務熱線
      技術支持Article
      介紹免疫沉淀CHIP的三個實驗步驟
      點擊次數:1355 更新時間:2021-10-23
        在生理狀態下把細胞內的DNA與蛋白質交聯在一起,通過超聲或酶處理將染色質切為小片段后,利用抗原抗體的特異性識別反應,將與目的蛋白相結合的DNA片段沉淀下來,以富集存在組蛋白修飾或者轉錄調控的DNA片段,再通過多種下游檢測技術(定量PCR、基因芯片、測序等)來檢測此富集片段的DNA序列。(檢測相關技術服務:Real-timePCR技術服務、基因芯片及結果驗證服服務、高通量測序及結果驗證服務)
        免疫沉淀CHIP技術實驗步驟
        染色質免疫共沉淀技術包括3個獨立的步驟,即固定、沉淀和檢測。
        1、固定
        甲醛能有效的使蛋白質-蛋白質,蛋白質-DNA,蛋白質-RNA交聯,形成生物復合體,防止細胞內組分的重新分布。首先在體內用甲醛固定DNA和蛋白質復合物,需要注意甲醇的交聯時間,如果過長,細胞染色質難以用超聲波破碎,影響ChIP結果,而且實驗材料也容易在離心過程中丟失;交聯時間如果過短,則交聯不*,產生假陰性。交聯反應可加入甘氨酸終止。然后用化學(微球菌酶)或者機械(超聲波)的手段將其隨機切成一定長度的染色質小片段(200~1000bp)。
        2、免疫沉淀
        利用目的蛋白質或者目的蛋白質上標簽的特異性抗體,通過抗原和抗體反應形成DNA-蛋白質-抗體復合體,然后沉淀此復合體,特異性地富集目的蛋白結合的DNA片段。
        3、目的片段的純化與檢測
        經過熱處理及交聯,釋放共沉淀的DNA;再將DNA片段純化后,對沉淀的DNA樣品進行檢測。目前檢測方法主要有3種:第1種是比較沉淀的模版與陰性和陽性對照PCR信號強度的普通PCR實驗,或者相對精確的定量PCR方法。第2種是將沉淀的DNA與DNA微陣列芯片雜交(ChIP-on-ChIP),以檢測多基因軌跡全部的相互作用。第3種是高通量DNA測序分析。

      滬公網安備 31011802001676號

      国产91精品在线| 伊人这里只有精品| 久久精品黄AA片一区二区三区| 国产精品剧情原创麻豆国产| 日韩精品无码一区二区中文字幕 | 国产精品国产AV片国产| 久久国产精品久久精品国产| 日本精品视频在线播放| 亚洲精品美女在线观看| 国产成人精品综合久久久久| 精品久久洲久久久久护士免费| 久久国产视频精品| 精品一区二区三区高清免费观看| 亚洲国产精品无码中文lv| 久久青青草原精品国产| 久久久久亚洲精品中文字幕 | 久热这里只精品99国产6_99| 日本精品一区二区久久久| 久久精品国产亚洲AV| 1313午夜精品理伦片| 久久亚洲精品中文字幕三区| 国产偷窥熟女高潮精品视频| 精品一区狼人国产在线| 久久这里的只有是精品23| 99re5在线精品视频热线| 亚洲精品无码专区在线在线播放| 四虎精品影库4HUTV四虎| 好叼操这里只有精品| 亚洲精品午夜国产va久久| 99热这里只有精品6免费| 久久99国产精品久久| 精品人妻系列无码人妻免费视频 | 国内精品免费视频自在线| 欧乱色国产精品兔费视频| 99热精品国产三级在线观看| 久久国产精品99精品国产987| 久久久久一级精品亚洲国产成人综合AV区| 日韩精品一区在线| 亚洲精品宾馆在线精品酒店| 国产人成精品香港三级在| 中文字幕精品一区影音先锋 |