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      RNA純化試劑盒操作步驟
      點擊次數:1541 更新時間:2022-07-19

        

       

       

      RNA純化試劑盒說明書

      RNA Cleanup Kit

      RNA純化試劑盒

       

      Cat. No.   K0589

      保存:室溫

       

      組分說明

       

       

                                                  Catalog no.             K0589

                                                    Kit Size                 20

                                                   Buffer RL               20 ml

                                          Buffer RW2concentrate)          11 ml

                                              RNase-Free Water             10 ml

                                                Spin Column RS               20

                                           Collection Tube1.5 ml)           20

                                           Collection Tube2 ml)             20

       

       

      產品簡介

       

          本試劑盒使用*的離心吸附柱,在高鹽條件下 RNA 與硅基質膜高效、專一地結合,適用于從酶促反應及其他多種方法提取的 RNA 溶液中進一步純化和濃縮 RNA,并將 RNA 樣品進行脫鹽處理,有效回收得到高純度的 RNA。該試劑盒最小可以將 RNA 樣品濃縮至 30-50 µl,回收得到的 RNA 可直接用于微點陣分析和 Real-time PCR 等敏感實驗。

      注意事項

       

      1.  預防RNase污染,應注意以下幾方面:

       

      1)使用無RNase的塑料制品和槍頭,避免交叉污染。

       

      2)玻璃器皿應在使用前于180℃高溫下干烤4小時,塑料器皿可在0.5 M NaOH中浸泡10分鐘,用水*沖洗后高壓滅菌。

      3)配制溶液應使用無RNase的水。

       

      4)操作人員戴一次性口罩和手套,實驗過程中要勤換手套。

       

      2.  第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明先在 Buffer RW2 中加入無水乙醇。

      3.  Buffer RL 如果產生沉淀,請加熱使其溶解后放置。

       

      4.  所有離心步驟均在室溫下進行,且所有操作步驟動作要迅速。

       

      自備試劑:無水乙醇(新開封或提取RNA專用)  

       

       

      操作步驟

       

       1.  RNA-Free Water 調整樣品至總體積至 100  μl,加入 350 μl Buffer RL,充分混勻。

       

       2.  加入 250  μl  無水乙醇,混勻。

       

       3.  將得到的溶液700  μl轉移到吸附柱(Spin Column RS)中(吸附柱已裝入收集管 2 ml Collection Tube  中),10,000rpm~11,500 x g)離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

       

       4.  向吸附柱中加入500  μl Buffer  RW2(用前檢查已加入無水乙醇), 10,000 rpm  離心20秒,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

       

       5.  重復步驟4

       

       6.  將吸附柱放回收集管中,12,000 rpm離心1分鐘。

       

       7.  將吸附柱裝入新的RNase-Free 1.5ml收集管中,向吸附膜的中間部位加入30-50  μl RNase-Free Water,室溫放置1分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,得到的RNA溶液保存在-70℃,防止降解。

       

           注意:  RNase-Free Water最好在70℃預熱,確保RNA洗脫充分;洗脫體積不應小于30 μl,體積過小影響回收率。

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