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      V79倉鼠肺細胞傳代/復蘇技巧
      點擊次數:322 更新時間:2024-08-13

      V79倉鼠肺細胞

      ,V79

      貨號:YJ-c008(種屬鑒定)

      價格: 1800.0

      規格: 1*10 6

      細胞介紹

      該細胞系由D.J.Griad通過肺癌組織移植培養建系,患者為58歲白人男性。A549能通過胞苷二磷酸膽堿途徑合成含有高含量不飽和脂肪酸的卵磷脂。

      細胞特性

      1 來源:倉鼠

      2 形態:成纖維細胞樣;貼壁生長

      3 含量:>1x106  細胞數

      4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

      5)  用途:僅供科研使用。

      對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

      1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10%FBS的培養基來終止消化。 

      3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

      3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

      V79倉鼠肺細胞.png


      下面T25瓶為例;

      1. 細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中,可使用血球計數板計數,來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×106~1×107個活細胞/ml.

      2. 1000rpm離心3-5min,去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ,按每1ml凍存液含1×106~1×107個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中,標注好名稱、代數、日期等信息。

      3. 將要凍存的細胞置于程序降溫盒中,-80度冰箱中過夜,之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

      2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗外包及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

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