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      K7M2wt+luc小鼠骨肉瘤成骨細胞產品介紹
      點擊次數:409 更新時間:2024-08-26

      K7M2wt+luc小鼠骨肉瘤成骨細胞

      ,K7M2wt luc

      貨號:YJ-0035a(K7M2wt種屬鑒定)

      價格: 3200.0

      規格: 1*10 6 

      細胞介紹

      抗原表達: CD31 陽性 [PubMed:1315100] 產物: 八因子 [PubMed: 11315100]; 整合唾液酸蛋白 (BSP) [PubMed11315100]; biglyan [PubMed: 11315100]; decorrin [PubMed:1315100]; villin 2 (ezrin) [PubMed: 11325848]. 骨唾液酸蛋白, biglyan, decorrin, osteopontin 的表達顯示其骨家族細胞特性。 在本庫通過支原體檢測。

      該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶Luc基因。

      細胞特性

      1 來源:BALB/c 器官: 骨 疾病: 骨肉瘤 來源轉移灶: 肺 細胞類型: 成骨細胞;

      2 形態:成骨細胞  貼壁生長

      3 含量:>1x106  細胞數

      4 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

      5)  用途:僅供科研使用。

      細胞篩選

      該細胞為穩定轉染Luc的細胞,隨細胞傳代次數的增加,其Luc熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。        

      建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。

      初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養基維持培養,若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養基繼續篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養基培養,至細胞密度約80%,可繼續加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養基正常培養。

      細胞接收后的處理

      1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

      2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10×20×)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

      3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

      4備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代 。                  

      一.培養基及培養凍存條件準備:

      1 準備DMEM(推薦:YJ-0001)培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%

      2 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

      3 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

      二.細胞處理:

      1 凍存細胞的復蘇:

      將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL完全培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,完全培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml完全培養基的培養瓶(或皿)中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

      2 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

      K7M2wt+luc小鼠骨肉瘤成骨細胞.png


      對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

      1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

      2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T251-2mLT752-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml10%FBS的培養基來終止消化。 

      3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按12的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

      3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

      2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

      如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

       

      實驗技術服務:

       


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