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      A2780+GFP人卵巢癌細胞+GFP傳代/復蘇技巧
      點擊次數:414 更新時間:2024-08-27

      A2780+GFP人卵巢癌細胞+GFP

      Human ovarian cancer cells ,A2780 GFP

      貨號:YJ-0040a(STR(A2780鑒定))

      價格: 3200.0

      規格: 1*10 6

      細胞介紹

      該細胞通過慢病毒轉染的方式攜帶GFP基因。

      細胞特性

      1)來源:卵巢

      2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長

      3)含量:>1*10 6細胞數

      4)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

      5)用途:僅供科研使用。

      細胞篩選

      該細胞為穩定轉染GFP的細胞,隨細胞傳代次數的增加,其GFP熒光強度會逐漸減弱。若實驗要求需要維持熒光強度,可以加入嘌呤霉素進行再次篩選。

      建議收到細胞后至少傳3代,凍存留種后再進行篩選。

      初次進行細胞篩選時,建議加入終濃度為1ug/ml嘌呤霉素的完全培養基維持培養,若無細胞漂浮或者漂浮較少,即可更換為含2ug/ml嘌呤霉素的完全培養基繼續篩選,以此類推,至最高藥物濃度為5ug/ml。若篩選過程中,漂浮細胞大于60%,則停止篩選,換成正常培養基培養,至細胞密度約80%,可繼續加入同濃度嘌呤霉素進行篩選。當加入5ug/ml嘌呤霉素時細胞正常增殖,可停止篩選,用不含藥完全培養基正常培養。

      運輸和保存

      干冰運輸及復蘇好存活細胞

      11mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

      2T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

      A2780+GFP人卵巢癌細胞+GFP傳代/復蘇技巧


      細胞接收后的處理

      1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h,若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯系我們。

      2)請在45X顯微鏡下確認細胞狀態,同時給剛收到的細胞拍照(10X,20X)各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態的依據。

      3)貼壁細胞:細胞在37℃培養箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養瓶中灌液培養基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養瓶中),加入新配制的完全培養基6-8mL,放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

      4備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的完全培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶12傳代 。                      

      一.培養基及培養凍存條件準備

      1)準備RPMI-1640(推薦YJ-0002)培養基;

      優質胎牛血清                                                       10%                      

      GlutaMAX-1谷氨酰胺            ( YJ-0900 )                        1%  

      P/S  雙抗                                                           1%

      2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5% 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%

      3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。

      2011年開始我們致力于在生命科學領域生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

      如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

      實驗技術服務:



      滬公網安備 31011802001676號

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