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      間充質干細胞成脂誘導分化試劑盒
      點擊次數:273 更新時間:2025-02-08

      間充質干細胞成脂誘導分化試劑盒

      ,成脂誘導液

      貨號:YJ-MSCYD-004

      價格: 1280.0

      規格: 100ml    200ml

      產品描述

      本產品為團隊精心優化的間充質干細胞成脂誘導分化試劑盒,可增強間充質干細胞向成脂細胞分化的能力。

      本產品僅用于科研用途,不可用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

      產品組成成分及保存

      試劑名稱

      體積(100mL規格/200mL規格)

      保存條件及有效期

      誘導分化添加劑

      5mL / 10mL

      -20℃1 Year

      誘導分化添加劑

      0.1mL / 0.2mL

      -20℃1 Year

      優質胎牛血清

      10mL / 20mL

      -20℃,1 Year

      細胞基礎培養基

      85mL / 170mL

      4℃,1 Year

      油紅O染色液

      5mL / 10mL

      4避光,1 Year

      注意

      1.為保證產品的有效性,請避免反復凍融。

      2.配制好的誘導培養基保存于2-8℃,有效期為2周,請根據實驗用量合理配制。

      產品使用說明

      1. 成脂誘導分化完全培養基的配制

      室溫條件下融化各因子及血清。各因子融化后,瞬時離心,使溶液集中于離心管底部。(注意:若因子或血清中有沉淀物,屬正?,F象,無須過濾,避免成分丟失。)

      根據實驗用量,于無菌操作臺中配制誘導分化完全培養基,建議每次配制50mL,配制比例見下表:

      試劑成分

      配制比例

      50mL配制體系

      誘導分化添加劑

      5%

      2.5mL

      誘導分化添加劑

      0.1%

      50uL

      優質胎牛血清

      10%

      5mL

      細胞基礎培養基

      85%

      42.5mL

      2. 成脂誘導分化實驗步驟

      建議取第3~5代、純度達90%以上、狀態良好的間充質干細胞,將其消化下來,離心收集,使用含10%FBS的完全培養基調整細胞密度,均勻鋪于培養瓶/板中,置于37℃5%CO2,飽和濕度的培養箱中培養。(細胞接種詳情參考表二

      培養器皿

      底面積

      細胞量

      培養液體積

      24孔培養板

      2cm/

      2×105cell/

      1mL/

      12孔培養板

      4.5cm/

      4.5×105cell/

      2mL/

      6孔培養板

      9.6cm/

      9.6×105cell/

      2mL/

      T25培養瓶

      25cm

      25×105cell

      5mL

      6cm培養皿

      21cm

      21×105cell

      5mL

      10cm培養皿

      55cm

      55×105cell

      10mL

      表二

      待細胞匯合度達80%~100%時,即可進行誘導分化。

      小心吸棄細胞培養上清,沿孔壁緩慢加入提前配制好的誘導分化完全培養基,置于37℃恒溫細胞培養箱中培養。(注意:完全培養基加入細胞前需提前置于37℃預熱。

      2~3day換用新鮮的誘導分化完全培養基。換液時,若細胞培養上清顏色變為澄清的黃色,是由于細胞量較大,培養基消耗較快導致的,請及時縮短換液周期。(注意:完全培養基加入前需提前置于37℃預熱。

      細胞誘導3周后,即可進行油紅O染色鑒定。

      3. 油紅染色分析

      細胞誘導分化結束后,小心吸棄細胞培養上清,1×PBS潤洗1~2次。加入適量細胞固定液,室溫固定30 min。(細胞固定液為4%中性甲醛溶液等,體積參考表二

      配制油紅O工作液:油紅O貯存液與蒸餾水按照32配制,(例:油紅O貯存液3mL,蒸餾水2mL),混勻。使用濾紙過濾,收集濾液,即為油紅O工作液。(注意:成脂細胞內的油滴極易脫落,操作時須謹慎。

      細胞固定完成后,吸棄細胞固定液,1×PBS潤洗2次。沿孔壁緩慢加入適量油紅O工作液,室溫染色30min。(注意:油紅O工作液底部可能會有沉淀,吸取時盡量不要觸及底部。若細胞染色后有沉淀,PBS洗去即可。)

      吸出染色液,PBS潤洗,去掉浮色。顯微鏡下觀察細胞染色效果。細胞內油滴著色,呈紅色。(注意:油紅O工作液不可重復使用,不建議回收。

      2011年開始我們致力于在生命科學領域、生物醫學實驗技術及論文潤色服務,協助客戶各類實驗服務及論文潤色十多年,是您值得信賴的科研合作伙伴!

      如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯系。

      實驗技術服務:



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