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      培養基配方
      點擊次數:365 更新時間:2025-05-28

      培養基配方

      常用培養基

      1)血液瓊脂(血平板):

         【配方一】    

         成分:普通營養瓊脂90rot;脫纖維羊血(或兔血)10ml

         制法:將已滅菌的普通營養瓊脂(pH7.6>加熱融化;冷卻至50℃左右,以無菌手續加入10ml脫纖維羊血(臨用前置37℃水浴箱預溫),輕輕搖勻(勿使有氣泡),傾注于滅菌平皿內,每一平皿(直徑9 cm)1315ml或分裝試管,制成斜面;待凝固后,抽樣置37℃培養1824h,觀察有無細菌生長;如無菌生長,置4℃備用。

         【配方二】

         成分:肉膏湯(pH7.8)800ml;硫酸鎂(493g/L)8 ml;脫纖維羊血80ml;瓊脂2123g5.0g/L對氨基ben甲酸8ml

         制法:將肉膏湯置三角燒瓶內,加入硫酸鎂、對氨基ben甲酸及瓊脂,混合并使液體浸濕瓊脂,121.3℃高壓滅菌30分鐘,取出冷至50℃左右,以無菌手續加入37℃水浴預溫的無菌脫纖維羊血或兔血,輕輕搖勻,傾注平板,凝固后,抽樣置37℃培養1824h,如無菌生長冷藏備用。

      2)巧克力色血瓊脂(巧克力平板):

         成分:與血瓊脂配方相同。

         制法:與血瓊脂相同,但于培養基中加入血液混勻后,須再置85℃水浴1015分鐘,使血液的顏色由鮮紅轉變為巧克力色;取出并冷至50℃左右,傾注平板,經無菌試驗后存4℃備用。

      3)麥康凱瓊脂:分離腸道桿菌用。

         成分:蛋白胨20g;乳糖10g10g/L的中性紅水溶液5ml;氯化鈉5g;瓊脂2025g;膽鹽5g(或牛膽酸鈉4g與去氧膽酸鈉1g),加蒸餾水1000ml

         制法:將蛋白胨、氯化鈉、膽鹽及乳糖加于500ml蒸餾水中加熱溶解;將瓊脂加于余下的500ml蒸餾水中加熱溶解;將上述兩液趁熱混合,調整pH7.4,以絨布過濾,按每瓶100ml分裝,115.6℃高壓滅菌20分鐘,待冷卻至5060℃時,每100ml培養基中加入經煮沸滅菌的10g/L中性紅溶液0.5ml,混合后傾注平板。

        注意事項:膽鹽能抑制部分非病原菌及革蘭氏陽性細菌的生長,但能促進某些革蘭氏陰性病原菌的生長;因含有乳糖及中性紅指示劑,故分解乳糖的細菌(如大腸桿菌),菌落呈紅色;不分解乳糖的細菌,菌落不呈紅色。

      4)伊紅美藍瓊脂(EMB):分離腸道桿菌用。

         成分:肉膏湯瓊脂(pH7.4)100ml20g/L的伊紅水溶液(滅菌)2ml;乳糖1g6g/L的美藍水溶液(滅菌)1mI

         制法:加熱溶化已滅菌的肉膏湯瓊脂,加入乳糖1g;待冷至50℃左右,加入伊紅及美藍溶液,混勻傾注平板,凝固后備用。

      5)羅氏培養基:分離結核桿菌用。

         成分:磷酸二氫鉀(無水)0.96g;天門冬酰胺(天門冬素)0.72g;枸櫞酸鎂0.12g;硫酸鎂(MgSO4·7H2O)0.048g;純甘油(中性)2.4ml;蒸餾水120ml;馬鈴薯粉6.0g,新鮮雞蛋68個;10g/L的孔雀綠溶液8ml

         制法:將磷酸二氫鉀至純甘油的各成份混合,置沸水中加熱溶解,加入馬鈴薯粉,邊加邊攪拌,注意勿結成塊,并繼續在沸水浴中加熱半小時,時加攪拌,待冷至65℃時加入全蛋液200ral10g/L孔雀綠溶液8ml,充分混勻,分裝于無菌試管,每管約56ml,塞上橡皮塞;置血清凝固器內經901h,制成斜面。

      6)沙保弱氏培養基:培養真菌用。

         成分:蛋白胨10g;葡萄糖40g;瓊脂20g;蒸餾水1000ml

         制法:上述成份混合加熱溶解(一般可不校正pH),分裝試管,121.3℃高壓滅菌15分鐘,趁熱制成斜面。如不加瓊脂即為沙保弱氏液體培養基。

      7)葡萄糖肉湯:用于增菌。

         成分:酵母浸膏3g,構櫞酸鈉3g;牛肉湯1000ml247g/L硫酸鎂20ml;葡萄糖3g;磷酸氫二鉀2g5g/L對氨基ben甲酸5ml

         制法:除葡萄糖及硫酸鎂外,其他各物混和,加熱溶解,校正pH7.6,再煮沸5分鐘,用濾紙過濾并分裝于100ml三角燒瓶中,每瓶50ml,包扎瓶口,121.3℃高壓滅菌15分鐘;將葡萄糖配成100g/L的水溶液,硫酸鎂配成247g/L的水溶液,分別高壓滅菌(葡萄糖為113℃)15分鐘,于每50ral、無菌肉湯內加入滅菌葡萄糖及硫酸鎂水溶液各1ml混勻,于37℃培養48h。證明無菌生長后存于4℃備用。

      8)解脲支原體培養基:

       成分:牛肉浸液70ml;蛋白胨1.0gNaCl 0.5gKH2PO4 0.15g4.0g/L酚紅0.5mI

       制法:調pH6.0,加熱融化后濾紙過濾,121.3℃高壓滅菌,無菌加入小牛血清20ral250g/L鮮酵母浸液10ml;青霉素20萬單位;400g/L尿素(G3濾器過濾除菌)0.5ml,分裝試管,每管4ml。如傾注平板,將上述液體培養基中加入瓊脂粉1.0g

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