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      堿性磷酸酶染色操作流程
      堿性磷酸酶染色操作流程
      更新時間:2025-02-05
      訪問量: 3453
      廠商性質: 生產廠家

      提供商: 上海研謹生物
      服務名稱: 堿性磷酸酶染色操作流程
      規格: 樣本
      實驗周期: 3周
      說明: 含包埋切片、拍照
      價格: 60元
      收費標準/服務周期/提供結果:
      歡迎咨詢詳談,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協議。
      更多實驗技術服務請瀏覽網站其他內容,或來電詳詢!

      堿性磷酸酶染色操作流程產品概述:

      堿性磷酸酶染色實驗服務

       

       

      堿性磷酸酶染色實驗技術簡介:

      堿性磷酸酶(AKP) 的顯示方法由Gomeri (1939) 提出,現在這種方法稱為Gomeri法。堿性磷酸酶是指磷酸單酯酶I,它能在pH8. 6~10.0的條件下分解磷酸單酯,對于與磷酸相接的醇基沒有特異性,Gomeri法是讓該酶在堿性條件下,分解甘油磷酸鈉,產生磷酸根。

      堿性磷酸酶染色實驗技術原理:

      在一定條件下,使細胞中的酶作用于酶的底物,使其產物在原地進行捕捉、沉淀轉化為有色產物。細胞組織中的堿性磷酸酶在堿性(PH9.0- 9.6)環境下使作用液中的底物(a- 磷酸萘酚鈉)水解,產生出a蔡酚,然后再與偶氮鹽偶聯,生成不溶性的耐曬染料(終產物的顏色因所用偶氮鹽的品種不同而有所不同)。

      實驗操作流程:

      1、取材、固定、包埋、切片;

      2.取已粘好烘干的切片兩塊,放入二甲苯(一)→二甲苯(二) (各3-4分鐘) 的染缸中進行脫蠟,再經100%乙醇(一)- +100%乙醇(二) - -95%乙醇- -90%乙醇- -70%乙醇- -30%乙醇- +z水。 每級各一分鐘,在移切片時,用鑷子夾住切片震蕩并提起,放下反復幾次,在移入下-染缸邊緣前稍停留。讓溶液滴凈后,再入下一染缸,以免把上一染缸溶液過多帶入下-染缸,而影響切片質量;

      3.將其中一塊切片以蠟筆作-標記(用作對照組切片),放入沸水中煮沸5分鐘;

      4.將兩塊切片均放入AKP作用液中孵育30-60分鐘,作用液要事先預熱到37"C,水浴中進行:

      5、取出切片在蒸餾水中洗滌;

      6、放入硝酸鈷溶液2-3分鐘;

      7.蒸餾水沖洗干凈,否則切片易被污染,影響定位;

      8、切片浸入硫化銨中2-3分鐘;

      9.蒸餾水沖洗干凈;

      10.經各級酒精脫水。即30%乙醇- -70%乙醇- -90%乙醇- -950%乙醇- -100%乙醇 (二)- -100%乙醇 (一),各級一分鐘在顯微鏡下觀察,細胞中有黑色沉淀存在的地方,就表明有酶的存在。煮沸的對照切片無黑色沉淀。

       

       

      實驗代做服務:

       

      免疫組化IHC染色實驗服務

      細胞、組織TUNEL凋亡染色實驗服務

      試劑盒免費代檢測

      實驗室代做實驗項目

       

      透射電鏡服務實驗服務

      石蠟/冰凍切片TUNEL凋亡

      核仁組成區嗜銀-AGNOR染色實驗服務

      免疫共沉淀(CHIRP)實驗

      RNA結合蛋白免疫沉淀(RIP)實驗代做

      酶聯免疫(ELISA)技術服務

      雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒

      喹諾酮類快速檢測試劑盒

      組織芯片/微陣列定制技術服務

       

      染色質免疫沉淀分析(CLIP)實驗服務

       

      多因子液相芯片技術(Luminex)實驗

      免疫細胞化學ICC實驗服務

      ATP/ADP檢測實驗服務

      蛋白雙向(2-D)電泳實驗服務

      蛋白相互作用分析

      堿性磷酸酶染色實驗服務

      PKC活性檢測實驗

      非標定量實驗

      (Label-free)

       

      DIGE技術實驗服務

      端粒酶活性檢測實驗

      細胞生長曲線的測定

      掃描電鏡服務

      NF-KB p65活性檢測實驗

       

      慢病毒包裝實驗服務

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